在微生物学研究和临床实践中,纸片法是一种简单而有效的细菌药敏试验方法。这种方法通过将含有抗生素的滤纸片放置于已接种细菌的琼脂平板表面,来评估不同抗生素对特定细菌株的抑制效果。
首先,需要准备所需的材料和设备,包括无菌培养皿、营养琼脂培养基、待测细菌悬液、标准抗生素溶液以及直径6毫米的无菌滤纸片。实验开始时,将融化的营养琼脂倒入培养皿中制成平板,并待其凝固后标记好测试区域。
接着,使用无菌操作技术将适量的细菌悬液均匀涂布在整个平板表面。然后,用无菌镊子夹取预先浸透了抗生素溶液的滤纸片,将其贴附于平板上的指定位置。确保每个滤纸片之间保持一定距离以避免相互干扰。
在恒温培养箱中培养过夜后,观察并测量抑菌圈的直径。如果某个抗生素能够产生明显的抑菌圈,则表明该菌株对该抗生素敏感;反之,则可能耐药或中介。根据抑菌圈大小与标准对照表进行比较,可以初步判断细菌对抗生素的敏感程度。
值得注意的是,在实际应用过程中还需注意控制变量,比如保证所有样品处理的一致性、选择合适的抗生素浓度等。此外,由于某些因素如温度变化可能会对结果造成影响,因此建议每次实验都设立阳性与阴性对照组以提高数据可靠性。
总之,纸片法因其操作简便、成本低廉且易于普及等特点,在基层医疗机构及科研机构中得到了广泛应用。它为快速筛选出有效的抗菌药物提供了重要参考依据,在合理使用抗生素方面发挥了积极作用。